一、含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定專(zhuān)屬性試驗(yàn)的區(qū)別

其實(shí)沒(méi)有什么區(qū)別的。

專(zhuān)屬性試空前驗(yàn)：是指在其他成分可能存在的情況下，采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性，能反映分析方法在有共存物時(shí)對(duì)供試物準(zhǔn)確而專(zhuān)屬的測(cè)定能力;是方法用于復(fù)雜樣品分析時(shí)相互干擾程度的度量。

其實(shí)就斗哪清是說(shuō)，看看這個(gè)實(shí)驗(yàn)會(huì)不會(huì)被干擾的意思。

那么含量的專(zhuān)緩局屬性試驗(yàn)就很簡(jiǎn)單了。第一是保證空白溶劑對(duì)主峰沒(méi)干擾，第二是用對(duì)照品標(biāo)定一下主成分的保留時(shí)間。如果你測(cè)定的物質(zhì)有輔料峰，那么把空白輔料也進(jìn)一針，表示對(duì)主成分沒(méi)有干擾就可以了。

雜質(zhì)的專(zhuān)屬性也是一樣的意思。要把各個(gè)雜質(zhì)分別進(jìn)樣，標(biāo)定一下保留時(shí)間。保證雜質(zhì)之間是可以分開(kāi)的，而且各個(gè)雜質(zhì)都不會(huì)影響主成分檢出。

另外有一點(diǎn)，就是破壞性試驗(yàn)，也算是專(zhuān)屬性試驗(yàn)中的內(nèi)容。也就是供試品用強(qiáng)光照射，高溫，高濕，酸、堿水解及氧化的方法進(jìn)行破壞，比較破壞前后檢出的雜質(zhì)個(gè)數(shù)和量。這部分內(nèi)容是含量中沒(méi)有的。算是不一樣的地方吧。

二、高效液相色譜方法學(xué)驗(yàn)證考察哪些內(nèi)容？

高效液相色譜方法學(xué)驗(yàn)證如下：

1、專(zhuān)屬性：查看被測(cè)物質(zhì)與被測(cè)結(jié)果間是激畢否正確且唯一對(duì)應(yīng)?？疾旆椒ǎ簩⑻幈粶y(cè)成分外的其他物質(zhì)均做空白干擾對(duì)照，包括流動(dòng)相、輔料空白、溶劑空白、其他成分（多組分產(chǎn)品）空白、如果方法有衍明悉芹生還應(yīng)包括衍生空白等等。

2、精密度：查看方法多次測(cè)定是否能夠得到相同的結(jié)果?？疾旆椒ǎ褐貜?fù)性試驗(yàn)，應(yīng)包括儀器精密度，方法精密度（多次測(cè)定同一樣品查看結(jié)果，即配制多個(gè)供試品溶液），中間精密度（不同人員不同時(shí)間不同儀器，最好試劑和實(shí)驗(yàn)室也更換，測(cè)定同一樣品，查看結(jié)果偏差）。

3、準(zhǔn)確度：測(cè)得結(jié)果與實(shí)際量間是否一致?？疾旆椒ǎ和ㄟ^(guò)回收率試驗(yàn)來(lái)確定，應(yīng)包含3個(gè)濃度至少9個(gè)樣品的測(cè)定結(jié)果，測(cè)定時(shí)應(yīng)采取對(duì)照品（或原料）加輔料等其他干擾，計(jì)算回收率和結(jié)果偏差。視方法而定一般回收率應(yīng)在95~105%，RSD小于2%。

4、線(xiàn)性：在線(xiàn)性范圍內(nèi)，測(cè)得峰面積與被測(cè)物質(zhì)的量是否能夠呈線(xiàn)性關(guān)系?？疾旆椒ǎ壕€(xiàn)性試驗(yàn)，應(yīng)取至少5個(gè)濃度點(diǎn)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)，液相色譜法中一般認(rèn)為R=0.9999以上才能算呈線(xiàn)性。

5、定量限：當(dāng)物質(zhì)達(dá)到定量限濃度以上時(shí)，該方法可以對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定量檢測(cè)?？疾旆椒ǎ寒?dāng)被測(cè)物峰高：信號(hào)噪音=10:1時(shí)，當(dāng)前濃度即為定量限。如果想做更加可靠的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在定量限處考察精密度和回收率。

6、耐用性：方法對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境的耐受程度。即當(dāng)實(shí)驗(yàn)條件發(fā)生細(xì)微變化時(shí)，方法仍然能夠保持測(cè)定的準(zhǔn)確?？疾旆椒ǎ和ㄟ^(guò)幾項(xiàng)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定：溶液穩(wěn)定性（相同溶液在幾小時(shí)內(nèi)多次進(jìn)樣查看結(jié)果），色譜條件變化（應(yīng)包括柱溫、流速、色譜柱批次、檢測(cè)波長(zhǎng)等條陸轎件的輕微變化）。

三、藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則

生物利用度是指劑型中的藥物被吸進(jìn)入血液的速率和程度。生物等效性是指一種藥物的不同制劑在相同的試驗(yàn)條件下，給以相同的劑量，反映其吸收速率和程度的主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)沒(méi)有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

口服或其他非脈管內(nèi)給藥的制劑，其活性成分的吸收受多種因素的影響，包括制劑工藝、藥物粒徑、晶型或多晶型，處方中的賦形劑、黏合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、包衣材料、溶劑、助懸劑等。生物利用度是保證藥品內(nèi)在質(zhì)量的重要指標(biāo)，而生物等效性則是保證含同一藥物的不同制劑質(zhì)量一致性的主要依據(jù)。生物利用度與生物等效性概念雖不完全相同，但試驗(yàn)方法基本一致。為了控制藥品質(zhì)量，保證藥品的有效性和安全性，特制訂本指導(dǎo)原則。何種藥物制劑需要進(jìn)行生物等效性或生物利用度試驗(yàn)，可根據(jù)有關(guān)部門(mén)頒布的法規(guī)要求進(jìn)行。

進(jìn)行藥物制劑人體生物利用度和生物等效性試驗(yàn)的臨床實(shí)驗(yàn)室和分析實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)提供機(jī)構(gòu)名稱(chēng)以及醫(yī)學(xué)、科學(xué)或分析負(fù)責(zé)人的姓名、職稱(chēng)和簡(jiǎn)歷。

一、生物樣品分析方法的基本要求

生物樣品中藥物及其代謝產(chǎn)物定量分析方法的專(zhuān)屬性和靈敏度，是生物利用度和生物等效性試驗(yàn)成功的關(guān)鍵。首選色譜法，如HPLC、GC以及GC-MS、LC-MS、LC-MS-MS聯(lián)用技術(shù)，一般應(yīng)采用內(nèi)標(biāo)法定量。必要時(shí)也可采用生物學(xué)方法或生物化學(xué)方法。

由于生物樣品取樣量少、藥物濃度低、內(nèi)源性物質(zhì)（如無(wú)機(jī)鹽、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、代謝物）及個(gè)體差異等多種因素影響生物樣品測(cè)定，所以必須根據(jù)待測(cè)物的結(jié)構(gòu)、生物介質(zhì)和預(yù)期的濃度范圍，建立適宜的生物樣品分析方法，并對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。

1．專(zhuān)屬性

必須證明所測(cè)定的物質(zhì)是原形藥物或特定的活性代謝物，內(nèi)源性物質(zhì)和相應(yīng)的代謝物不得干擾樣品的測(cè)定。對(duì)于色譜法至少要提供空白生物樣品色譜圖、空白生物樣品外加對(duì)照物質(zhì)色譜圖（注明濃度）及用藥后的生物樣品色譜圖。對(duì)于復(fù)方制劑應(yīng)特別加強(qiáng)專(zhuān)屬性研究，以排除可能的干擾。

2．標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)與線(xiàn)性范圍

根據(jù)所測(cè)定物質(zhì)的濃度與響應(yīng)的相關(guān)性，用回歸分析方法獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)高低濃度范圍為線(xiàn)性范圍，在線(xiàn)性范圍內(nèi)濃度測(cè)定結(jié)果應(yīng)達(dá)到試驗(yàn)要求的精密度和準(zhǔn)確度。

必須用至少6個(gè)濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，應(yīng)使用與待測(cè)樣品相同的生物介質(zhì)，線(xiàn)性范圍要能覆蓋全部待測(cè)濃度，不允許將線(xiàn)性范圍外推求算未知樣品的濃度。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不包括零點(diǎn)。

3．精密度與準(zhǔn)確度

要求選擇3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品同時(shí)進(jìn)行方法的精密度和準(zhǔn)確度考察。低濃度選擇接近定量下限（LLOQ），在LLOQ的3倍以?xún)?nèi)；高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的上限；中間選一個(gè)濃度。每一濃度至少測(cè)定5個(gè)樣品。

精密度用質(zhì)控樣品的日內(nèi)和日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）表示，RSD一般應(yīng)小于15%，在LLOQ附近RSD應(yīng)小于20%.

準(zhǔn)確度是指用特定方法測(cè)得的生物樣品濃度與真實(shí)濃度的接近程度，一般應(yīng)在85%～115%范圍內(nèi)，在LLOQ附近應(yīng)在80%～120%范圍內(nèi)。

4．定量下限

定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上的最低濃度點(diǎn)，要求至少能滿(mǎn)足測(cè)定3～5個(gè)半衰期時(shí)樣品中的藥物濃度，或Cmax的1/10～1/20時(shí)的藥物濃度，其準(zhǔn)確度應(yīng)在真實(shí)濃度的80%～120%范圍內(nèi)，RSD應(yīng)小于20%，信噪比應(yīng)大于5.

5．樣品穩(wěn)定性

根據(jù)具體情況，對(duì)含藥生物樣品在室溫、冰凍和凍融條件下以及不同存放時(shí)間進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確定生物樣品的存放條件和時(shí)間。

6．提取回收率

應(yīng)考察高、中、低3個(gè)濃度的提取回收率，其結(jié)果應(yīng)一致、精密和可重現(xiàn)。

7．質(zhì)控樣品

質(zhì)控樣品系將已知量的待測(cè)藥物加入到生物介質(zhì)中配制的樣品，用于質(zhì)量控制。

8．質(zhì)量控制

應(yīng)在生物樣品分析方法驗(yàn)證完成之后開(kāi)始測(cè)試未知樣品。每個(gè)未知樣品一般測(cè)定一次，必要時(shí)可進(jìn)行復(fù)測(cè)。生物樣品每天測(cè)定時(shí)應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并隨行測(cè)定高、中、低3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品，每個(gè)濃度雙樣本。質(zhì)控樣品測(cè)定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%，低濃度點(diǎn)偏差一般應(yīng)小于20%，最多允許兩個(gè)不在同一濃度的質(zhì)控樣品結(jié)果超限。如不合格，則該天樣品測(cè)試結(jié)果作廢。

9．測(cè)試結(jié)果

應(yīng)詳細(xì)描述所用的分析方法，引用已有的參考文獻(xiàn)，提供每天的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)、質(zhì)控樣品及未知樣品的結(jié)果計(jì)算過(guò)程。還應(yīng)提供全部未知樣品分析的色譜圖，包括全部相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和質(zhì)控樣品的色譜圖，以供審查。

二、普通制劑

（一）受試者的選擇

對(duì)參加生物利用度和生物等效性研究的受試者有一些特殊的要求。

1．受試者條件

一般情況選健康男性，特殊情況說(shuō)明原因，如婦科用藥。兒童用藥應(yīng)在成人中進(jìn)行。具體要求如下。

（1）性別為男性。

（2）年齡一般要求18～40歲；同一批試驗(yàn)?zāi)挲g不宜相差10歲。

（3）體重與標(biāo)準(zhǔn)體重相差±10%，同一批試驗(yàn)受試者體重應(yīng)相近，體重單位以千克（kg）計(jì)。

（4）身體健康，無(wú)心、肝、腎、消化道、代謝異常、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等病史，并進(jìn)行健康體檢（如檢查心電圖、血壓、心率、肝功能、腎功能、肺功能和血象等），應(yīng)無(wú)異常。特殊藥物還需要相應(yīng)的其他指標(biāo)，如降血糖藥物應(yīng)檢查血糖水平。

（5）無(wú)過(guò)敏史，無(wú)體位性低血壓史。

（6）兩周前至試驗(yàn)期間不服用其他任何藥物，試驗(yàn)期間禁煙、酒及含咖啡因的飲料。

（7）試驗(yàn)單位應(yīng)與志愿受試者簽署知情同意書(shū)。